Для доказательства участия G-белков в действии инсулина на активность АЦ был применен широко распространенный подход, в котором используется набор гуаниновых нуклеотидов, способных в разной степени либо стимулировать ГТФ-азную активность G-белков в присутствии ГТФ и его аналогов - ГТФγS, ГИДФ и тем самым активировать АЦ, либо ингибировать ГТФ-азную активность G-белка в присутствии ГДФβS.
Было исследовано влияние ГТФ и ряда его негидролизуемых аналогов на активность АЦ в присутствии и отсутствии гормона (Табл. 6).
Таблица 6.
Влияние гуаниновых нуклеотидов в отсутствии и присутствии инсулина на активность АЦ во фракции мышечных мембран крысы и моллюска
Воздействия
|
Животные |
Крыса |
Моллюск |
Активность АЦ (%) |
Контроль |
100±1.01% |
100±1.3% |
Инсулин (10-8М) |
222±1.3%
(+122%) |
186±1.8%
(+86%) |
ГТФγS (10-5М) |
242±1.4%
(+142%) |
470±9.4%
(+370%) |
ГИДФ (10-5М) |
236±1.8%
(+136%) |
269±4.9%
(+169%) |
ГТФ (10-5М) |
135±1.05%
(+35%) |
163±5.1%
(+63%) |
ГДФβS (10-5М) |
95±1.2%
(-5%) |
92±2.4%
(-8%) |
Инсулин + ГТФγS |
473±2.5%
(+373%)
[109%] |
726±20.3%
(+626%)
[170%] |
Инсулин + ГИДФ |
399±8.2%
(+299%)
[41%] |
441±12.3%
(+341%)
[86%] |
Инсулин + ГТФ |
277±10.1%
(+177%)
[20%] |
279±8.4%
(+179%)
[30%] |
Инсулин + ГДФβS |
102±5.4%
(+2%)
[-17%] |
105±4.3%
(+5%)
[-86%] |
Примечание: в круглых скобках – активирующий АЦ эффект используемых агентов в% по отношению к базальной активности, принятой за 100%. В квадратных скобках – потенцирование эффекта гормона в присутствии гуаниновых нуклеотидов в %.
Согласно представленным данным, ГТФγS, ГИДФ, ГТФ стимулируют активность АЦ в мышечных мембранах крыс и моллюсков. При совместном действии инсулина и гуаниновых нуклеотидов происходит усиление (потенцирование) эффекта гормона по сравнению с аддитивным эффектом гормона и гуаниновых нуклеотидов, действующих раздельно - в присутствии ГТФγS, ГИДФ и ГТФ на +109%, +41% и +20% у крыс и на +170%, 86% и 30% у моллюсков (табл. 6). ГДФβS же напротив снижает АЦ стимулирующий эффект инсулина как в мышцах крыс, так и моллюсков.
Потенцирование эффекта инсулина в присутствии ГТФγS, ГИДФ, ГТФ и отсутствие потенцирующего эффекта в присутствии ГДФβS свидетельствует о вовлеченности Gs-белков в АЦ сигнальный механизм действия пептидов инсулинового суперсемейства.
Таблица 7. Влияние коклюшного и холерного токсинов на базальную, инсулин- и ИФР1-стимулируемую активность АЦ в скелетных мышцах крысы и моллюска A.cygnea
|
Активность АЦ (пкмоль цАМФ/мин/мг белка) |
Воздействия |
Скелетные мышцы крысы |
Гладкие мышцы моллюска |
|
Без КТ |
+КТ |
Без КТ |
+КТ |
Без пептидов |
39.7±3.4 |
48.5±2.0 |
63.2±4.1 |
69.1±9,6 |
|
(100%) |
(100%) |
(100%) |
(100%) |
Инсулин |
67.9±3.6 |
48.2±2.7 |
200.5±14.4 |
74.2±7.6 |
10-9М |
(171%) |
(99%) |
(317%) |
(108%) |
ИФР-1 |
57.4±2.1 |
43.1±1.6 |
139.2±12.4 |
76.8±7.3 |
10-9М |
(145%) |
(89%) |
(220%) |
(111%) |
|
Без ХТ |
+ХТ |
Без ХТ |
+ХТ |
Без пептидов |
39.6±2.6 |
79.7±2.7 |
47.4±3.0 |
94.3±5.6 |
|
(100%) |
(100%) |
(100%) |
(100%) |
Инсулин |
69.3±2.8 |
105.8±7.4 |
151.7±9.8 |
134.0±7.5 |
10-9М |
(175%) |
(133%) |
(320%) |
(142%) |
ИФР-1 |
56.7±4.2 |
106.2±6.5 |
100.0±5.4 |
122.6±8.8 |
10-9М |
(143%) |
(133%) |
(210%) |
(130%) |
Смотрите также Почесуха взрослых
Почесуха – это категория дерматологических заболеваний, отличающаяся нестерпимым зудом и присутствием на кожном покрове небольшой узелковой сыпи.
Причины почесухи взрослых
Почесуха взрослых на ...
Стоматологи могут остаться без работы
Способов заработать существует великое множество. Но распорядиться заработанным экономно получается не всегда. Не даром существует великое множесво маркетинговых приемов, предлагающих нам якобы « ...
Опухоли головного мозга. Симптомы опухоли головного мозга
В отличие от опухолей других органов, опухоли головного мозга возникают и растут интракраниально — в полости черепа, имеющего жесткий объем. Внутричерепное содержание представлено мозговой ткань ...
|