|
Для доказательства участия G-белков в действии инсулина на активность АЦ был применен широко распространенный подход, в котором используется набор гуаниновых нуклеотидов, способных в разной степени либо стимулировать ГТФ-азную активность G-белков в присутствии ГТФ и его аналогов - ГТФγS, ГИДФ и тем самым активировать АЦ, либо ингибировать ГТФ-азную активность G-белка в присутствии ГДФβS.
Было исследовано влияние ГТФ и ряда его негидролизуемых аналогов на активность АЦ в присутствии и отсутствии гормона (Табл. 6).
Таблица 6.
Влияние гуаниновых нуклеотидов в отсутствии и присутствии инсулина на активность АЦ во фракции мышечных мембран крысы и моллюска |
Воздействия
|
Животные | |
Крыса |
Моллюск | |
Активность АЦ (%) | |
Контроль |
100±1.01% |
100±1.3% | |
Инсулин (10-8М) |
222±1.3%
(+122%) |
186±1.8%
(+86%) | |
ГТФγS (10-5М) |
242±1.4%
(+142%) |
470±9.4%
(+370%) | |
ГИДФ (10-5М) |
236±1.8%
(+136%) |
269±4.9%
(+169%) | |
ГТФ (10-5М) |
135±1.05%
(+35%) |
163±5.1%
(+63%) | |
ГДФβS (10-5М) |
95±1.2%
(-5%) |
92±2.4%
(-8%) | |
Инсулин + ГТФγS |
473±2.5%
(+373%)
[109%] |
726±20.3%
(+626%)
[170%] | |
Инсулин + ГИДФ |
399±8.2%
(+299%)
[41%] |
441±12.3%
(+341%)
[86%] | |
Инсулин + ГТФ |
277±10.1%
(+177%)
[20%] |
279±8.4%
(+179%)
[30%] | |
Инсулин + ГДФβS |
102±5.4%
(+2%)
[-17%] |
105±4.3%
(+5%)
[-86%] |
Примечание: в круглых скобках – активирующий АЦ эффект используемых агентов в% по отношению к базальной активности, принятой за 100%. В квадратных скобках – потенцирование эффекта гормона в присутствии гуаниновых нуклеотидов в %.
Согласно представленным данным, ГТФγS, ГИДФ, ГТФ стимулируют активность АЦ в мышечных мембранах крыс и моллюсков. При совместном действии инсулина и гуаниновых нуклеотидов происходит усиление (потенцирование) эффекта гормона по сравнению с аддитивным эффектом гормона и гуаниновых нуклеотидов, действующих раздельно - в присутствии ГТФγS, ГИДФ и ГТФ на +109%, +41% и +20% у крыс и на +170%, 86% и 30% у моллюсков (табл. 6). ГДФβS же напротив снижает АЦ стимулирующий эффект инсулина как в мышцах крыс, так и моллюсков.
Потенцирование эффекта инсулина в присутствии ГТФγS, ГИДФ, ГТФ и отсутствие потенцирующего эффекта в присутствии ГДФβS свидетельствует о вовлеченности Gs-белков в АЦ сигнальный механизм действия пептидов инсулинового суперсемейства.
Таблица 7. Влияние коклюшного и холерного токсинов на базальную, инсулин- и ИФР1-стимулируемую активность АЦ в скелетных мышцах крысы и моллюска A.cygnea |
|
Активность АЦ (пкмоль цАМФ/мин/мг белка) | |
Воздействия |
Скелетные мышцы крысы |
Гладкие мышцы моллюска | |
|
Без КТ |
+КТ |
Без КТ |
+КТ | |
Без пептидов |
39.7±3.4 |
48.5±2.0 |
63.2±4.1 |
69.1±9,6 | |
|
(100%) |
(100%) |
(100%) |
(100%) | |
Инсулин |
67.9±3.6 |
48.2±2.7 |
200.5±14.4 |
74.2±7.6 | |
10-9М |
(171%) |
(99%) |
(317%) |
(108%) | |
ИФР-1 |
57.4±2.1 |
43.1±1.6 |
139.2±12.4 |
76.8±7.3 | |
10-9М |
(145%) |
(89%) |
(220%) |
(111%) | |
|
Без ХТ |
+ХТ |
Без ХТ |
+ХТ | |
Без пептидов |
39.6±2.6 |
79.7±2.7 |
47.4±3.0 |
94.3±5.6 | |
|
(100%) |
(100%) |
(100%) |
(100%) | |
Инсулин |
69.3±2.8 |
105.8±7.4 |
151.7±9.8 |
134.0±7.5 | |
10-9М |
(175%) |
(133%) |
(320%) |
(142%) | |
ИФР-1 |
56.7±4.2 |
106.2±6.5 |
100.0±5.4 |
122.6±8.8 | |
10-9М |
(143%) |
(133%) |
(210%) |
(130%) |
Смотрите также 6. Методы диагностики
При исследовании крови выявляется нормоцитоз или умеренный лейкоцитоз, в
формуле крови — небольшой нейтрофилез, лимфопения. В период реконвалесценции
может появляться небольшая эозинофилия ...
Об очередных поправках к закону «О лекарственных средствах»
Государственная, дума 8 июля с.г. приняла в первом чтении законопроект №139775-4,
внесенный группой ее депутатов и сенаторов и содержащий изменения и дополнения к
Федеральному закону «О лекарствен ...
ВВЕДЕНИЕ
Аденовирусная инфекция — антропонозные вирусные заболевания
преимущественно с воздушно-капельным механизмом передачи, вызывающиеся
многочисленными серотипами аденовирусов и характеризующие ...
|